BD SurePath Liquid-based Pap Test

Papa test na tečnoj podlozi
Liquid-based cervical cytology, LBC

Ginekološki karcinomi su glavni uzroci obolevanja i umiranja među ženama. Rak grlića materice (karcinom cerviksa uterusa) je najčešći zloćudni tumor ženske populacije u svetu, nakon karcinoma dojke. Prema podacima Instituta za javno zdravlje Batut, rak grlića materice je drugi uzrok obolevanja i četvrti uzrok umiranja od raka među našom ženskom populacijom. Rak grlića materice može biti uspešno izlečen ukoliko se dijagnostikuje u ranoj fazi i tretira blagovremeno.

Skrining test za rano otkrivanje karcinoma grlića materice je cervikalni bris za Papanikolau test (Papa), koji se smatra jednim od najboljih testova prevencije u humanoj onkologiji. Papa test se sprovodi u kombinaciji sa kolposkopskom procedurom za vizuelno ispitivanje grlića materice i vagine pod uveličanjem. Sam Papa test se zasniva na citološkoj analizi prikupljenog sloja ćelija sa cerviko-vaginalnog područja kojom se utvrđuje eventualno prisustvo izmenjenih (abnormalnih) ćelija, promena koje imaju potencijal da prerastu u ozbiljne lezije (oštećenja) pa čak i kancer. Displazije, premaligne promene na ćelijama epitela grlića materice, mogu se identifikovati Papa testom. Tretiranje početnih promena tzv. premalignih lezija je najbolji način da se spreči njihov prelazak u maligne promene, kada je sve daleko neizvesnije i teže. Zahvaljujući redovnim ginekološkim pregledima i primeni Papa testa u dijagnostici lezija grlića kao sekundarnom metodom prevencije, incidenca karcinoma grlića materice i smrtnost su smanjeni za 70%.

Međutim, nisu svi Papa testovi isti. Nova generacija testa za skrining raka grlića materice Papa test na tečnoj podlozi (Liquid-based cervical cytology, LBC) je razvijen kako bi se unapredila dijagnostička pouzdanost konvencionalne Papa metode. Naime, Papa test može imati lažno pozitivne i lažno negativne rezultate zbog neadekvatnog uzorkovanja i pripreme preparata, moguće greške u laboratorijskoj detekciji i interpretaciji. Kod konvencionalnog Papa testa velika je mogućnost neadekvatnog uzorkovanja cerviko-vaginalnog brisa i/ili neadekvatnog prenošenja ćelija iz brisa na predmetno staklo. Interpretacija nalaza može biti otežana zbog hemoragijske i inflamatorne pozadine. Za razliku od konvencionalnog Papa testa, LBC metoda rezultuje očuvanjem celokupne ćelijske populacije dobijene prilikom uzorkovanja kao i formiranjem tankog sloja preparata sa čistom pozadinom. Dakle, LBC predstavlja savremenu, usavršenu verziju Papa testa u tečnom medijumu, koja omogućava otkrivanje promena na grliću materice u ranoj fazi. Pored toga, LBC metoda uzorkovanja pruža i jednostavnu mogućnost dodatne dijagnostike, identifikovanje visokorizičnih tipova humanog papilloma virusa (HPV) i dodatne molekularne dijagnostičke testove iz istog uzorka.

Glavne prednosti nove metode na tečnoj podlozi
u odnosu na konvencionalnu metodu

Pouzdano prikupljanje uzorka je prvi korak u dobijanju tačnih rezultata: BD SurePath™ LBC procedura zahteva standardizovano prikupljanje citološkog uzorka uz pomoć Rovers četkice za uzorkovanje sa odvojivim vrhom (Rovers® Cervex® Combi brush). Dobijeni uzorak se šalje u laboratoriju u tečnom medijumu za konzervaciju (BD SurePath preservative fluid), tako da su sve ćelije dostupne za dalju pripremu i analizu preparata. U bočicama za uzorkovanje (BD SurePath Collection Vial) ćelije su zaštićene tokom transporta i dodatno se mogu čuvati nedeljama. Set za uzorkovanje je dizajniran tako da unapredi brigu o pacijentu nudeći standardizovanu i pozitivnu identifikaciju uzorka uspostavljenu primenom 2D barkoda, dok ginekolozima omogućava pogodnost prikupljanja jednog uzorka za Papa test i molekularno dijagnostičko testiranje.

Osnovna razlika prilikom uzimanja uzoraka između konvencionalnog razmaza i LBC je ta što se ćelije uzete sa i iz grlića materice, prenose direktno u posudicu sa tečnošću za konzerviranje, umesto što se razmažu po mikroskopskom staklu. Ovo osigurava da se 100% uzorka pošalje u laboratoriju, dok se procedurom u konvencionalnoj metodi prosečno odbacuje i do 37% ćelija.

Kroz standardizovani jedinstveni proces obrade i prečišćavanja uzorka u laboratoriji (BD PrepMate™), razdvaja se i uklanja krv, sluz i ometajući materijali iz uzorka. Postupak obogaćivanja uzorka podrazumeva proces centrifugiranja i taloženja kroz BD reagens za taloženje (BD density reagens) koji omogućava da se izvrši uklanjanje svih ne-dijagnostičkih komponenti kao što su inflamatorne ćelije, mukus, krv i lubrikanti. Na taj način efikasnom i pouzdanom obradom prenosi se samo dijagnostički najrelevantniji materijal na preparat (BD Totalys™ SlidePrep), čime je značajno smanjen broj neadekvatnih ili nezadovoljavajućih rezultata. Na osnovu ovakvog metoda prikupljanja i obogaćivanja uzorka dobija se jasna prezentacija ćelija, čime je povećana detekcija abnormalnih ćelija i otkrivanje promena na grliću materice u ranoj fazi u odnosu na konvencionalni test.

Detekcija se radi kompjuterizovanim pristupom uz isključivanje subjektivne komponente u citološkoj dijagnostici. Instrument BD Totalys SlidePrep obezbeđuje potpuno automatizovanu pripremu i bojenje pločica, smanjujući rizik od kontaminacije. Olakšana je vizuelizacija dijagnostički relevantih epitelnih ćelija, čime je obezbeđena povećana detekcija promena na grliću materice u ranoj fazi.

Mogućnost jednostavnog dodatnog testiranja je važna, naročito ako se ima u vidu preporuka da između dva uzorkovanja ćelija cerviksa treba da prođe 60 dana. I dok sa konvencionalnim Papa testom dodatni molekularni i biomarker testovi nisu mogući, LBC metoda uzorkovanja omogućava da se iz istog uzorka mogu uraditi HPV tipizacija i dodatni DNK testovi.

BD SurePath LBC procedura pokazuje veću pouzdanost
od bilo koje druge trenutno dostupne metode

Studija dokaza boljih performansi BD SurePath Liquid-based Pap Test
u odnosu na konvencionalnu metodu i ThinPrep Pap Test

Nezavisna studija je sprovedena u organizaciji Erasmus Univerzitetskog medicinskog centra na odeljenju za javno zdravlje u Holandiji (Erasmus University Medical Center for the Department of Public Health, Rotterdam, Netherlands) na oko 6 miliona uzoraka tokom 13 godina u okviru nacionalnog skrining (screening) programa. Analiza je bazirana na podacima nacionalnog registra karcinoma u Holandiji i upotrebe PALGA baze podataka, u kojoj su sadržani svi citološki i histološki izveštaji slučajeva karcinoma uključujući i karcinom cerviksa. Izvršeno je poređenje kumulativne incidence dijagnostikovanog karcinoma cerviksa u okviru 72 meseca nakon dobijanja normalnog nalaza između konvencionalne metode i Papa testa na tečnoj podlozi primenom BD SurePath™ Pap testa i Hologic ThinPrep® Pap Test. Dokazana je značajno veća osetljivost u detekciji Cervical Intraepithelial Neoplasia (CIN) progresivnih lezija stepena 2 i više i rizika razvoja karcinoma cerviksa između dva skrininig testiranja. Zaključak autora je da primena BD SurePath™ Liquid-based Pap Testa kao primarne metode obezbeđuje višu HSIL+ detekciju bolesti i nižu stopu nezadovoljavajućih rezultata u odnosu na konvencionalnu metodu i ThinPre® Pap Test.

Referenca:

Rozemeijer Kirsten, Naber Steffie K, Penning Corine, Overbeek Lucy I H, Looman Caspar W N, de Kok Inge M C M et al. Cervical cancer incidence after normal cytological sample in routine screening using SurePath, ThinPrep, and conventional cytology: population based study. BMJ 2017; 356:j504

U poređenju sa konvencionalnom metodom